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如何生成真實的液相色譜分析結(jié)果?

點擊次數(shù):1027 發(fā)布時間:2022-05-26
  如何生成真實的液相色譜分析結(jié)果?
  作為一名液相色譜工作者,您關(guān)心的還是生成真實實驗數(shù)據(jù),這些數(shù)據(jù)可以在任何其他實驗室的相同條件下被普遍接受和重現(xiàn)。如果忽視*的規(guī)范,即使使用復(fù)雜的工具也無法達(dá)到目的。系統(tǒng)適用性是在化學(xué)分析中生成數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。
  液相色譜法,是從事制藥、食品、法醫(yī)學(xué)、聚合物、生命科學(xué)和環(huán)境研究的實驗室中應(yīng)用的技術(shù)。數(shù)以千計的液相色譜儀在球制藥行業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量控制實驗室工作,每天都會產(chǎn)生大量數(shù)據(jù),這有助于開發(fā)安的藥物。在根據(jù)此類數(shù)據(jù)做出決策之前,HPLC系統(tǒng)應(yīng)滿足系統(tǒng)適用性的要求至關(guān)重要。
  什么是系統(tǒng)適用性?系統(tǒng)適用性測試是色譜分析的重要組成部分。它們幫助我們確定檢測靈敏度、分辨率和重現(xiàn)性是否足以滿足所需的分析。美國藥典(USP)是原料藥色譜指南的權(quán)威來源。USP第621節(jié)規(guī)定系統(tǒng)適用性測試是氣相和液相色譜分析的一個組成部分?;谶@樣的概念,設(shè)備、電子設(shè)備、分析操作和待分析的樣品構(gòu)成一個可以進(jìn)行評估的整體系統(tǒng)。這意味著除非滿足系統(tǒng)適用性的要求,否則不接受任何樣品分析。
  導(dǎo)致HPLC分析中系統(tǒng)適用性失敗的因素有多,小編總結(jié)了以下幾點:
  自動進(jìn)樣器–由于無法提供設(shè)定體積的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,晶度較差。
  色譜柱——老化的色譜柱或堵塞的色譜柱會由于理論塔板數(shù)減少而導(dǎo)致性能下降。色譜柱老化的情況有多,也有存在柱頭污染導(dǎo)致色譜柱使用壽命縮短報廢的問題。
  泵–由于操作部件的磨損而無法提供恒定流速的流動相。
  流動相–制備規(guī)定混合物時的錯誤和脫氣不*。
  樣品和參考制備–制備不或注射前未使用溶劑進(jìn)樣口過濾器過濾。樣品雜質(zhì)和流動相雜質(zhì)一定要去除,否則進(jìn)入液相系統(tǒng)會造成多問題。在色譜柱前添加保護(hù)柱能夠預(yù)防雜質(zhì)污染柱頭,造成柱頭塌陷等問題。
  需要多久進(jìn)行一次系統(tǒng)適用性測試?根據(jù)監(jiān)管機(jī)構(gòu)的指導(dǎo)方針,系統(tǒng)適用性應(yīng)符合整個色譜系統(tǒng)的要求,而不僅僅是單個模塊。每當(dāng)設(shè)備或關(guān)鍵試劑系統(tǒng)發(fā)生重大變化時,應(yīng)在樣品注入前進(jìn)行適用性測試。系統(tǒng)失效時獲得的樣本分析結(jié)果對系統(tǒng)適用性的要求沒有意義。
  系統(tǒng)適用性必須在受監(jiān)管的測定之前和整個過程中進(jìn)行。在色譜運行開始時應(yīng)用適用性測試并假設(shè)系統(tǒng)將在運行期間正常運行是不夠的。包含主要成分和預(yù)期雜質(zhì)的測試混合物可以在開始時注入并在測試過程中散布。在面臨系統(tǒng)適用性失敗時,分析人員應(yīng)立即停止分析。在診斷出問題并采取補(bǔ)救措施后,應(yīng)重進(jìn)行適用性測試。只有在滿足系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)后才應(yīng)恢復(fù)實際樣品的分析,而不僅僅是失敗的標(biāo)準(zhǔn)。

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